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三、现代广告形式由于先进技术和媒介的出现，现代广告在继承古代广告形式的基础上，有了长足的进步。先进的媒介，精湛的制作技术，创造了许多高效率的广告形式，其传播范围、速度、对象和传播方式都远比古代的广告要宽阔、迅速、广泛和高超得多。（一）报纸广告报纸广告是现代广告的重要形式，它的出现是在近代的事情，比报纸的出现要晚。在我国1200多年前的唐初，便有最早的官报《邸报》，据认为是世界上最早的报纸。《邸报》在宋朝开始定期出版发行，明朝开始用活字排版。清朝时《邸报》更名为《京报》。这份报纸只在宫廷和官僚之间传阅，不对外发行，也不准刊登广告。在我国出现报纸广告是在战争后。1840年第一次　战争失败后，上海等五个城市被辟为通商口岸，外国“洋货”大量通过口岸城市向内地倾销，洋人也开始在口岸城市投资设厂。在此情况下，报纸广告便开始在上海等地大量涌现。外国人开始在中国办报，从南扩展到北方，在半个多世纪中先后创办了300余份报纸，多用中文出版。主要的报纸有《上海新报》、《万国公报》、《申报》、《新闻报》等，当时这些报纸主要刊登船期广告和市场行情、货物广告，其目的都是为了推销舶来商品和劳务服务，沟通中外商业行情。　19世纪末，我国开始出现民族资产阶级办的报纸，用来刊登国货广告，和外商“商战”。这些报纸有1873年创办于汉口的《昭文新报》、1874年创办于香港的《循环日报》、创办于上海的《汇报》，它们大都刊登很多广告。1907年清朝末年创刊的《政治官报》也允许登商业广告，并制定了广告章程，随后出现的许多新办报纸也都刊登广告，提倡国货。　在17世纪的欧洲，由于第一次工业革命的兴起，工商业变得较为发达，报纸广告也得以发展。英国最早的报纸《伦敦周报》在1622年开始发行，三年后开始刊出广告。1625年《英国信使报》刊出一则图书出版广告，1650年《新闻周报》刊出了寻马悬赏启示，都被认为是英国最早的报纸广告。美国独立前，第一家报纸《波士顿新闻通讯》在1704年创刊时刊登了一则向广告商推荐报纸作为宣传媒介的广告。美国广告之父本杰明?富兰克林于1729年创办《宾西法尼亚日报》，在创刊号的头版上刊出了一则肥皂广告，不久，这份报纸的发行量和广告量都跃居首位。到1820年时，美国已拥有报纸532家，都用相当版面刊登广告。（二）杂志广告最早的杂志广告出于何时，由于史料缺乏，目前尚难肯定。1710年英国《观察家》杂志曾经刊登过茶叶、咖啡、巧克力的广告和拍卖物品、房产、书刊及成药的广告，相信杂志广告的出现肯定在这以前。美国的杂志多出版于18世纪初叶，这些早年出版的杂志只是一些小册子，多数不刊登广告。直到19世纪中叶美国经济开始走向繁荣，杂志广告才逐步发展。第一家中文杂志是1815年8月在马来亚的马六甲创办的《察世俗每月统计传》，而第一家在我国境内出版的中文杂志则是于1833年在广州创办的《东西洋考每月统计传》月刊，内容有社会新闻、宗教、政治、科学和商业动态等。这些杂志均刊出中文广告。“五四”运动前后，各种刊物纷纷面世，也大多刊登广告，作为解决经费来源和改善员工生活的措施。（三）广播广告广播广告主要指无线电台和有线电台的商业广告。1844年美国工程师塞缪尔?莫尔斯发明了电报，次年即用来传递新闻。1906年世界上第一座广播电台在美国建立，开始播音。　1922年美国创建了第一座商业无线电台，正式开展商业广告播放。1924年美国人埃尔创建了第一个无线电联播网，开展大规模商业广告活动；到1928年时，通过无线电广播广告的费用即已达到1050万元。我国于1922年开始创办电台，但电台正式开展广告活动则是在1927年开始。（四）电视广告电视广告是广告中的后起之秀，它兼有报纸、广播和**的视听功能。世界上最早的电视台于1929年在英国试播，1936年正式建成开播。美国在1941年才开始播放商业广告。电视的大规模商业化是发生在第二次世界大战后的事，电视广告在西方已成为举足轻重的广告形式。我国于1958年建成第一座电视台，13年开始试播彩色电视，而在19年12月才开播商品广告。　报纸、杂志、广播和电视等广告形式被称为四大媒体广告，其广告费用占整个广告市场的广告费用的绝大部分。据美国1983年的统计，四大媒体广告收入的百分别为：报纸13．4％，杂志19．6％，广播6．3％，电视60．7％。　除了四大媒体广告之外，现代广告形式还有：橱窗广告，这是在19世纪末随着百货公司的出现而广泛运用的广告形式；霓虹灯广告，1896年英国化学家拉姆斯发明了霓虹灯后，将其逐渐应用到商业广告中。霓虹灯广告1910年首次出现在法国巴黎，现在已成为户外广告的主要形式；路牌广告，出现于19世纪末，到本世纪20年代已很盛行，至今风行不衰；**广告和幻灯广告，流行于本世纪初，现在还多见；交通广告，是指在汽车、轮船的身上以及码头、车站等处设立的广告牌，日常多见；POP售点广告；礼品广告；包装广告，如购物袋等。由于现代科技的进步，又出现了空中广告。空中广告分飞行广告、书云广告、烟雾广告。飞行广告是用飞机、气球、气艇刷写标语和带动标语等。书云广告是在地面上用抛物线反射器的技术在夜空或暗云上面打字。烟雾广告是飞机喷出的烟来书写广告。这种烟由于加了轻石蜡油等化学剂，能附着于空气微粒上较长时间。此外还有卫星广告、电视报纸、电子广告、激光广告、光纤广告、录像广告、传真广告、电话广告、闭路电视和有线电视等广告媒体。随着科学技术的进步，新的广告媒体将不断出现，广告媒体将会越来越丰富。　　 第三节　广告的功能现代广告业的长足发展和不断进步，其主要原因在于社会化大生产所带来的商品生产和大众多层次的物质需要的高度发达。现代化的社会大生产具有巨大的能量，足以生产数额巨大的商品，同时，由于现代运输技术的发展和国际合作的广泛开展，使流通领域变得广大。正是由于这种社会化大生产所带来的巨大数量的商品生产和销售，产品日新月异，市场竞争异常激烈。商品的丰富，必然使市场从卖方市场向买方市场转变，这是引起竞争的根本原因。产品交易市场变得广阔辽远，地区封闭和地区界限被打破，商品销售国际化。由于市场庞大，生产与消费之间重重相隔，中间流转环节增多，因而商品广告宣传活动就变成了面对某一地区或某一层次的大众，而不是具体的某一名顾客，商品的生产也是为了满足某一地区或某一层次的消费者的共同消费欲求。同时，由于科学技术日益进步，产品种类繁多，新产品日新月异，消费者已难于在购买商品时进行比较选择，而是习惯于凭印象和消费习惯认牌购买，即进入所谓的“印象”交易时代。　由于现代市场的这些特点，要加速商品的社会化大生产的全过程，就必须充分地利用有效的广告宣传，迅速准确地把商品信息及时传播到广大消费者当中，使大量的产品能够快捷地从生产流通转入消费。因此，现代广告业是密切联系生产和消费的桥梁，是市场营销的重要组成部分，也是社会化分工中必不可少的行业。实践证明，广告在社会经济生活中所发挥的作用是不可替代的。一、信息传播功能商业广告是服务于商品流通的，为产品进入消费提供服务，与“物流”（物流：是指商品实体的运动也就是使用价值的运动。）、“商流”（商流：是指商品、货币与所有权的运动或转移，也就是商品价值的运动。）一起共同承担完成商品使用价值的运动和价值交换的全过程。商业广告把有关生产方面的信息传递给消费者，向消费者提供商品或劳务信息，这就是广告的信息传播功能。　由于新的科学技术在社会化大生产中的广泛应用，现代社会商品的流向往往是分正反两个方面同时进行的。反向的从消费市场得来的消费者的需求信息，首先传递给生产者，而后，再把生产者的有关产品信息正向传递给消费者，自此周而复始，循环不已，而现代广告活动，则是正式从市场调查入手以广告后的市场信息反馈为终的这样一个全过程。因此，广告对于生产者来说，是了解市场信息的渠道，而对消费者来说，则是商品信息的来源。　另一方面，从信息流的角度来考查，广告既为物流、商流服务，同时，也对物流和商流起到一定的指导作用。商品从生产领域达到消费领域的顺利流通是有条件的，即必须在数量上质量上和时间、地点以及具体的消费对象（消费单位和消费者）等诸方面均要顺利接口，密切衔接；而商品的供需又通过价格竞争即价格规律对商品生产自发地起着调节作用。广告活动所提供的信息流，可以通过正确的市场调查和科学的预测提供依据，减少商品生产的盲目性，同时，广告宣传还可以疏通物流和商流渠道，缩短流通时间，刺激消费需求，提高商流的时间效益，在一定程度上促使商品经济繁荣。　新技术在广告业的广泛应用，使商业广告的信息功能的范围不断扩大。目前广泛出现的国际广告公司，开展国际市场的广告业务经营，它们利用通讯卫星、电脑处理机、传真设备等，通过“连线系统”作业，密切注视着国际市场的商品信息动态，同各方人士有着密切的联系。新科技革命的演进所带来的世界信息产业的发展过程，亦是人类超自然空间手段完善、广告业迈向全球的过程。随着电脑技术、计算机技术、通信技术的进一步普及和发展，广告的信息传递功能将进一步发展和强化，发挥更高的效能。例如，由于电道的数量增加，不同频道可将节目的重点集中于特定的对象；　而报纸出版商可以运用计算机同时制成不同内容的多页广告，每页针对不同的读者；“电子报纸”的出现，则可以通过广播、闭路电视节目或传真设备把报纸广告送到人们各自的家中；杂志的个体化可为顾客提供自己所需要的广告服务；直接邮寄广告可通过计算机掌握各阶层人们的需求，同时还可以把各种广告资料准确无误地邮寄给可能对销售作出反应的人。与此相似，消费者也可以通过传真电话等现代设备，向超级市场选购所需的产品。可以预料，在不久的将来，广告业的信息功能还将不断地得到强化，广告机构将与商情调研机构和市场预测机构融为一体，为社会商业经济生活提供更完美的服务。二、指导消费的功能认识商品是购买产品的前提，只有加深了对商品的认识，才有可能激发起购买兴趣和购买欲望。特别是在现在商品市场中，由于科学技术的突飞猛进，新产品日新月异，商品种类繁多，各类商品的功能各异，同时，许多商品都分散在各个商业网点，消费者迫切需要了解商品的性能和产、供、销情况。广告通过对商品信息的有效传播，向消费者介绍商品的厂牌、商标、性能、规格、用途特点、价格，以及如何使用、保养和各项商业服务措施，这实际上是在帮助消费者提高对商品的认识程度，指导消费者如何购买商品。尤其是新上市产品，广告的消费指导尤为重要。　暨南大学商学系在1982年的一次广告调查中所获资料表明，北京、广州两市的干部职工在回答抽样调查问卷时，回答广告对商品选购有帮助者占17．4％，稍有帮助者占44．5％，没有帮助的占22．8％，态度不明确者占15．3％。从调查结果可以看出，认为广告对选购商品有帮助的或稍有帮助的合计占61．9％。这还是在我国广告刚刚起步，广告活动相对较少、广告水平相对较低的年代时的情况。现在，由于广告技术的发展，广告水平不断提高，广告规模也不断扩大，我们相信对广告的消费指导作用取信任态度的已远不止这个数。　广告对消费者购买行为的影响，不仅是起一般的让消费者认识商品的作用，更重要的是广告在指导消费的同时，还有刺激消费需求的作用。广告的连续出现，就是对消费者的消费兴趣与欲求的不断刺激过程。　广告刺激需求包括两方面的内容：初级需求和选择性消费。初级需求是指对某类商品的需求。新产品进入市场后，多数运用广告来刺激初级需求，如19年及其以后的十年内电视机市场的变化。刚开始是黑白电视机的上市，厂家通过广告宣传，介绍该产品的视听兼具的优越性；晚些时候，彩色电视机上市，广告则通过突出宣传彩色电视机的逼真效果和清晰图象来刺激消费者的初级消费欲求，从而使消费者的消费欲求发生转移。随后出现的电脑选台彩色电视机、电脑遥控彩色电视机和平面直角遥控彩色电视机的上市，也基本上根据其产品各自的特色，进行了旨在刺激消费者的初级消费欲求的广告宣传。选择性需求（消费）是指对特定商品牌子的需求，这是在初级需求形成后的进一步发展。广告通过介绍某一牌子商品的优点和有别于其他同类产品的特色，从而刺激选择性需求，引导消费者认牌购买。　广告在指导消费、刺激需求方面，还起着创造流行时尚的作用。许多流行性商品的出现，是与广告的大肆渲染分不开的；消费者的消费习惯，也会受到广告的影响而改变，接受新的消费观念，雀巢咖啡的流行就是一例。　广告的消费指导作用，为人们提供了丰富的商品信息，介绍了各类商品的质量特点，提供了劳务服务，从而使人们及时地购买到自己所需要的商品或劳务，丰富人们的物质文化生活，节约购买时间，使人们有更多的时间从事工作、学习和，为广大消费者的生活提供了方便。三、沟通产销渠道、促进商品销售的功能在现代化的社会化大生产中，生产和流通是统一的生产过程中的两个相辅相成的要素。企业生产出来的产品，只有通过流通领域才能够进入消费，实现其使用价值。广告在沟通产销渠道、疏通产供销关系上，起着桥梁作用。市场经济的发展，已经完全打破了地域界线，整个市场变得完全开放，流通渠道增多而流通环节相对变少，地不分南北，人无论中西，都在市场经济中生活。现在的广告已成为工商企业加速商品流通和扩大商品销售的有效工具，被誉为“运用先进媒体的超级推销巨人”。另外、还得强调一点，马克思曾经强调过：“在商品生产上，流通和生产一样重要，从而流通当事人和生产当事人一样必要。”由此可见广告对加速流通的重要性。　广告宣传的推销作用，首先是从引起消费者的注意开始的，进而诱发他们对商品的兴趣，激起他们的购买欲望，促成购买行为。连续不断的广告宣传，可以使潜在的购买者实现购买，从而使商品增加销售。而在新的市场上开展广告宣传，则可以开辟新的销路，使产品销量激增。内蒙古自治区包头绝缘材料厂处于边远地区，其生产的绝缘材料虽然产品质量在国内已达先进水平，但由于信息不畅，销售渠道不通，产品总是难以销售，造成积压。1981年以来，他们了广告宣传活动，先后在全国13个省市作了广告，并取邮寄广告方式把产品目录邮寄到各地需用绝缘材料的单位，同时在中国国际贸易杂志、中国机械设备季刊登了广告，从而开拓了国内国际市场，实现了产品的顺利销售，获得较好的经济效益。　我国幅员辽阔，人口众多，是一个相当广阔的消费市场。由于社会经济欠发达，目前不少地区还处于交通不便、经济信息传播不及时的状况，因此，广告宣传对于沟通城乡市场、加速商品流通就有十分重要的意义。广告的作用，不仅在于巩固市场，提高市场占有份额，而且还能在创造需求的基础上，开辟新的市场。四、鼓励竞争、促进生产经营与管理的功能由于广告宣传活动具有明确的针对性诉求，并且需要对广大消费者进行说服，因此，在广告活动中，就必须明确地宣传产品的生产厂家、牌号、商标等，同时还必须充分强调所宣传的产品的特点和优于同类产品之处，以激发消费者的注意和兴趣，促成消费者认牌购买。这样，广告宣传就成了企业之间开展产品竞争、争夺市场的手段，同时，也刺激和促进了生产厂家或劳务服务性企业提高生产能力，改善经营管理。　广告对企业的促进作用，首先在于促进产品质量的提高。由于广告宣传可以收集到用户和消费者的意见，从而要求企业生产出适销对路、品质优良的产品，创造出各种优质名牌产品，以提高市场占有率。因此，产品的质量就成了企业今后在产品市场争夺中决定其胜负存亡的关键。商品生产的发展，必然会引起竞争。在新产品日益增多、特别是同类产品增多的情况下，市场竞争达到白热化的程度。这就迫使企业在提高产品质量上做文章，在新的功能产品开发上做文章。　在企业产品质量达到相当高水平之后，企业为了扩大其产品的市场占有份额或开辟新的产品市场，以获取更大的经济利益，就势必扩大企业的生产规模，提高生产能力。这是对产品进行广告宣传给生产企业带来的第二个好处。社会再生产过程是生产和流通过程的统一。生产决定流通，但分配、交换和消费又反过来决定生产。对扩大再生产更是如此。企业生产的产品在市场立足，并不意味着企业取得了最佳的经济效益，而只有在企业达到规模经营之后，企业的经济效益核算指标——投入产出比率才会相对较佳。因此，企业通过市场竞争来提高企业自身的生产能力，发展企业的生产规模，就成为企业增强其市场竞争能力、提高产品的市场占有份额、开拓新的产品销售市场的必由之路。　同时，由于价值规律的调节作用，使得价值因素在同类产品进行市场争夺时也成为决定企业成败的决定性因素之一。因此，为了提高产品竞争力，就必须使产品有一个合理的竞争价格，而要达到这一点，唯一的可行途径是通过改善企业的经营管理来降低商品的生产和流通成本。这样，广告宣传的竞争，就成了促进企业改善经营管理的有效手段。　竞争是一种压力，工商企业在市场竞争中为了处于不败之地，就必须处处维护自己的信誉，保持并不断提高产品质量，努力开发新产品，提高生产能力，提高服务层次，加强企业与消费者的良好关系。这一切都必须通过改善企业的经营管理来实现。在市场竞争中，广告不仅是企业产品的宣传书，而且是企业的保证书，同时，还是企业给生产同类产品的其他企业的挑战书。企业所登的广告，本身是企业向社会大众提出的保证书，而其他企业的广告则是对本企业的挑战。 五、传授新知识、新技术的功能现代经济生活中，任何一件新产品的生产上布，都是应用现代化科学技术的结果。据信，柯达彩色胶片公司一年投入的新产品研制费用就达数百亿美元。因此，每当新产品上市，就必须通过广告向广大消费者宣讲新产品的性能、质量、工作原理以及使用方法等涉及科学技术进步的新知识和新技术。这样，广告就有意识地承担起了一部分新知识和新技术的社会教育功能，向广大消费者传授科技领域的新知识、新发明和新创造，而这些都有利于开拓广大人民群众的视野，活跃他们的思想，丰富他们的物质和文化生活。

PCR扩不出来，紧急求助

偶尔接触，只要用清水冲洗干净，是不会有伤害的，如果长期接触是非常有害。这主要是因为石油里含有大量的苯。

1，皮肤经常接触苯，会导致皮肤红肿，干燥，起水泡，还可以导致刺激性皮炎及中枢和周围神经功能障碍。

2，由于苯的挥发性大，暴露于空气中很容易扩散。人和动物吸入或皮肤接触大量苯，会引起急性和慢性苯中毒。有研究报告表明，引起苯中毒的部分原因是由于在体内苯生成了苯酚。

苯对中枢神经系统产生麻痹作用，引起急性中毒。重者会出现头痛、恶心、呕吐、神志模糊、知觉丧失、昏迷、抽搐等，严重者会因为中枢系统麻痹而死亡。少量苯也能使人产生睡意、头昏、心率加快、头痛、颤抖、意识混乱、神志不清等现象。摄入含苯过多的食物会导致呕吐、胃痛、头昏、失眠、抽搐、心率加快等症状，甚至死亡。

3，吸入20000ppm的苯蒸气5-10分钟便会有致命危险。

长期接触苯会对血液造成极大伤害，引起慢性中毒。引起神经衰弱综合症。苯可以损害骨髓，使红血球、白细胞、血小板数量减少，并使染色体畸变，从而导致白血病，甚至出现再生障碍性贫血。苯可以导致大量出血，从而抑制免疫系统的功用，使疾病有机可乘。有研究报告指出，苯在体内的潜伏期可长达12-15年。

妇女吸入过量苯后，会导致月经不调达数月，卵巢会缩小。对胎儿发育和对男性生殖力的影响尚未明了。

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我认为，“溴酚蓝带（约300bp）前后各有一条带，且两条带亮度差不多”，而“阴性对照（没加模板）只在溴酚蓝带后有一条带”。可以用实验组和阴性对照组比较，若两者溴酚蓝带后的带位置一直，那么应该是引物二聚体。

至于PCR，应从很多方面考虑，我有一个优化的方法：

PCR必需具备下述基本条件：模板核酸（DNA或RNA）、人工合成的寡核苷酸引物、合适的缓冲体系、合适的Mg2+浓度、三磷酸脱氧核苷酸、耐热DNA聚合酶、温度循环参数、其它因素如二甲基亚砜、甘油、石蜡油、明胶等。

1．引物

PCR扩增产物的大小是由特异引物限定的，因此引物的设计与合成对PCR的成功与否有着决定性的意义。

l引物合成的质量：合成的引物必须经聚丙烯酰胺凝胶电泳或反向高压液相层析（HPLC）纯化。因为合成的引物中会有相当数量的“错误序列”，其中包括不完整的序列和脱嘌吟产物以及可检测到的碱基修饰的完整链和高分子量产物。这些序列可导致非特异扩增和信号强度的降低。引物不用时应存于–20℃保存。引物的设计原则：见引物的设计

l引物的用量：一般PCR反应中引物的终浓度为0.1~1umol/L，引物浓度过低则产物量降低；引物浓度过高会促进非特异产物合成，还会增加引物二聚体的形成，它们与靶序列竞争DNA聚合酶和dNTP,从而使靶序列的扩增量降低。

2．缓冲液

目前最为常用的缓冲体系为10~50mmol/L。Tris是一种双极性离子缓冲液，20℃时其pKa值为8.3,△pKa值为–0.021/℃。因此,20 mmol/L Tris–HCI(pH8.3,20℃)在实际PCR中,pH变化于6.8~7.8之间。改变反应液的缓冲能力,如将Tris浓度加大到50mmol/L, pH8.9,有时会增加产量。反应混合液中50mmol/L以内的KCl有利于引物的退火, 50mmol/L NaCl或50mmol/L以上的KCl则抑制Taq DNA聚合酶的活性。有些反应液中以NH4+代K+,其浓度为16.6mmol/L。反应中加入小牛血清白蛋白(100μg/ml)或明胶(0.01%)或Tween20(0.05%~0.1%)有助于酶的稳定,反应中加入5 mmol/L的二巯苏糖醇(DTT)也有类似作用,尤其在扩增长片段(此时延伸时间长)时,加入这些酶保护剂对PCR反应是有利的。

3.Mg2+

lMg2+是Taq DNA聚合酶活性所必需的，也影响着引物的退火，模板与PCR产物的解链温度，产物的特异性，引物二聚体的形成等。Mg2+浓度过低时，酶活力显著降低；过高时，则酶催化非特异的扩增。

lPCR混合物中的DNA模板、引物和dNTP的磷酸基因均可与Mg2+结合，降低Mg2+浓度，而Taq DNA聚合酶需要的是游离Mg2+。因此，PCR中Mg2+的加入量要比dNTP浓度高0.2~2.5m mol/L。最好对每种模板,每种引物均进行Mg2+浓度的优化。另外还需注意引物和模板DNA原液中如含EDTA等螯合剂也会影响游离Mg2+浓度。

l优化Mg2+浓度法:首先须知模板DNA,引物和dNTP浓度和设定的PCR循环参数。反应中的PCR缓冲液中不加Mg2+。Mg2+是从10mmol/L MgCl贮存液中逐一加入反应管中。开始以0.5mmol/L递增(0.5、1.0、1.5、2.0、2.5~5.0mmol/L)，在确定了Mg2+大概浓度以后，再在该浓度上下，以0.2 m mol/L递增和递减几个浓度来精确确定Mg2+的最适浓度。

4．三磷酸脱氧核苷酸

0?2?0?2 l贮备dNTP液应用NaOH调pH至中性，其浓度用分光光度计测定。贮备液为5~10 mmol/L，分装后–20℃保存。在PCR的重复热循环过程中其热稳定性应为：50循环后约有50%仍为dNTP。

l 反应中每种dNTP（dATP，dGTP，dTTP和dCTP）的终浓度为20―200umol/L,在此范围中，PCR产物量、特异性合成和忠实性间的平衡最佳。所用的四种dNTP终浓度应相等，以使错误掺入率降至最低。最低的适宜dNTP浓度可根据特定靶序列长度和碱基组成来确定。保持四种dNTP的浓度均在10~15umol/L以上，对保持碱基掺入的忠实性是很重要的。dNTP终浓度大于50 mmol/L时会抑制Taq DNA聚合酶活性。

ldNTP的类似物也可掺入PCR产物。

5．耐热DNA聚合酶

l自从耐热Taq DNA聚合酶引入PCR后，又有多种耐热DNA聚合酶（VENT和Tth等）相继用于PCR。目前仍以Taq DNA聚合酶应用较多。不同来源聚合酶制备条件、测定方法和（或）单位定义有所不同，使用时需加以注意。

l酶的需要量可根据不同的模板分子或引物而变化。当优化PCR时，最好在每100μ1反应体积中加入0.5~5U酶的范围内试验最佳酶浓度。如果酶浓度太高，则琼脂糖凝胶电泳中会出现非特异扩增带；过低时，则靶序列产量很低。

lPCR后可通过下述方式之一灭活Taq DNA聚合酶：（1）99~100℃加热10min；(2)加入EDTA-Na至10mmol/L螯合Mg2+；（3）酚一氯仿抽提、乙醇沉淀PCR产物。

6．温度循环参数

①变性温度与时间：PCR的变性一步很重要，此步若不能使靶基因模板和（或）PCR产物完全变性，变会导致PCR失败。典型的变性条件是95℃30s或℃30s，更高的温度可能更有效，尤其是对富含G+C的靶基因。DNA在其链分离温度（strand separation temperature,Tss）时的变性只需几秒钟，然而反应管内部达到Tss还需一定时间。变性温度太高会影响酶活性。最简单的方法是在加Taq聚合酶前选使模板在先℃变性lmin，对PCR的成功亦有益处。环状质粒DNA模板最好酶切线性化，因环状DNA复性极快。在扩增短片段（100~300bp）时，可用简便、快速的两步PCR法，同时在5~10个循环后，将变性温度降至87~90℃可改善PCR产量。具体降低程度则根据具体反应和使用的PCR仪而定。

②复性温度与时间：如果说变性温度对PCR反应的成败是关键，那么复性温度则决定着PCR的特异性。引物复性所需的温度与时间取决于引物的碱基组成、长度和浓度。合适的复性温度应低于扩增引物在PCR条件下真实Tm值的5℃。根据下式计算最适复性温度（Tm）有助于PCR的成功。

另一种更简便的方法是通过引物的有效长度(Ln)来估算。在此，还需引入另一概念，即有效启动温度（effective priming temperature Tp）。Tp是最佳引物介导扩增发生时的最高温度。Tp在一定范围（20~35个核苷酸）内与Ln呈直线相关。Lp=22+1.45(Ln):其中Ln=2（G+C）+（A+T）最适复性温度为Tp±2~5℃。Tp值较引物模板的Tss值高5~10℃，这是因引物复性后，DNA聚合酶很快发生聚合反应，在引物3’端加上数个碱基使引物–模板更稳定，易于在较高温度下发生延伸。研究表明，引物的复性是受动力因素控制的，而不是受热力学参数控制的。它取决于引物解离与延伸效率间的平衡。Tp仅是PCR的最适复性温度，也是PCR最佳特异性温度，在等位基因特异PCR（AS–PCR）时决定Tp很重要。Tp值基本上不受Mg2+浓度影响，当Mg2+由1.5mmol/L升至10 mmol/L时，Tp才升高3℃。确定了复性温度后，复性时间并不是关键因素。但复性时间太长会增加非特异的复性。复性时间也不能太短（≥30s），如用手控温度反应，复性状态的时间不能太长，耽搁过长会增加非特异复性。

③延伸温度与时间

引物延伸温度一般为72℃（较复性温度高10℃左右）。不合适的延伸温度不仅会影响扩增产物的特异性，也会影响其产量。72℃时，核苷酸的掺入率为每秒35~100个核苷酸,这取决于缓冲体系、pH、盐浓度和DNA模板的性质。72℃延伸1min对于长达2kb的扩增片段是足够的。然而，延伸时间决定于靶序列的长度与浓度。3~4 kb的靶序列需3~4 min延伸，延伸时间过长会导致非特异扩增带的出现。PCR中前几个循环延伸时间应足够长以使靶序列延伸完全，对很低浓度底物的扩增延伸时间要长些。

④循环数

循环数决定着扩增程度。在其它参数都已优化条件下，最适循环数取决于靶序列的初始浓度。过多的循环会增加非特异扩增产物的数量和复杂性（见平台效应）。当然，循环数太少，PCR产量就会极低。在初始靶序列为3X105，1.5X104，1X103和50拷贝分子时，其循环数可分别为25~30，30~35，35~40和40~45个循环。

除循环数外，扩增效率也决定扩增程度的重要因素。实验表明，以染色体DNA为模板时，第25~30个循环过程中，扩增DNA明显增加。扩增程度（Y）、起始DNA量（A）、扩增效率（R）和循环数（n）间的关系为：Y=A（I+R）n效率为100%时，25个循环后，Y=225·A=33 554 432A，而效率R=90%，n=25时，Y=1.925=9 307 649A，扩增产物减少了72%，由此可见扩增效率对扩增程度的影响。

⑤其它因素

高温起动（hot start）：由于Taq DNA聚合酶低温下仍具有活性。因此在一般PCR反应的开始加热变性DNA后再加酶的过程中，引物可与模板发生非特异复性，这些非特异复性在达到72℃前就由Taq 聚合酶在其3'端聚合上几个碱基并稳定了这种非特异复性引物。因此，可出现非特异延伸和扩增。用高温起动法便可克服这一缺点，即使Taq聚合酶仅在反应达到较高温度（>70℃）时才发挥作用。这可通过在高温（>70℃）下加入某些必需因子（DNA聚合酶，模板DNA，Mg2+或引物等）来控制。这种方法不仅可增加PCR的特异性，还能增加其敏感性，并可减少引物二聚体的形成和引物的自我复性。这是因为在扩增前加热可促进引物的特异复性与延伸，因此增加了有效引物的长度。

7．PCR促进剂：

1．二甲基亚砜（DMSO）：许多耐热DNA聚合酶厂定推荐在PCR反应中加入10%DMSO，这可能是DMSO有变性DNA的作用。DMSO的使用对大肠杆菌DNA聚合酶I K1enow片段是有益的，但对Taq DNA聚合酶有抑制作用，一般反应中应尽量不用DMSO。不过，在复合PCR中可以用。

2．甘油：有报道，反应中加入5%~20%甘油有助于PCR反应的复性过程，尤其对G+C含量高和二级结构多的靶序列以及扩增长片段（>1.5kbp）更适用。

3．氯化四甲基铵（TMAC）：在反应中加入1X10–4~1X10–5mol/L的TMAC可促进PCR，去除非特异扩增，而不抑制Taq聚合酶。

4．T噬菌体基因32蛋白质（gp32）：加入0.5~1μl的gp32（lnmol/L, PHarmacia）可使Taq聚合酶对长片段DNA的扩增改善至少10倍。

5．石蜡油：反应中所用石蜡油质量要高，不能含抑制Taq DNA聚合酶活性的杂质。加石蜡油目的是防止反应液蒸发后引起的冷却与反应成分的改变。石蜡油的有无对反应影响较大。但现在PE–Cetus公司又研制了一种新型PCR仪–9600型基因扩增PCR系统，免除了加石蜡油的步骤。

希望对你有用。

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Express Mail Service，[1]邮政特快专递服务。它是由万国邮联管理下的国际邮件快递服务，是中国邮政提供的一种快递服务，主要是取空运方式，加快递送速度，一般来说，根据地区远近，一般1－8天到达。 该业务在海关、航空等部门均享有优先处理权、它以高速度、高质量为用户传递国际、国内紧急信函、文件资料、金融票据、商品货样等各类文件资料和物品。 目前，我国邮政的EMS业务已与世界上200多个国家和地区建立了业务关系；国内已有近2000个大、中、小城市办理EMS业务。 [编辑本段]EMS业务简介　　提供该服务的为中国速递服务公司，是中国邮政集团公司直属全资公司，主要经营国际、国内EMS特快专递业务，是中国速递服务的最早供应商，也是目前中国速递行业的最大运营商和领导者。公司拥有员工20,000多人，EMS业务通达全球200多个国家和地区以及国内近2,000个城市。

EMS特快专递业务自1980年开办以来，业务量逐年增长，业务种类不断丰富，服务质量不断提高。除提供国内、国际特快专递服务外，EMS相继推出国内次晨达和次日递、国际承诺服务和限时递等高端服务，同时提供代收货款、收件人付费、鲜花礼仪速递等增值服务。

EMS拥有首屈一指的航空和陆路运输网络。依托中国邮政航空公司，建立了以上海为集散中心的全夜航航空集散网，现有专用速递揽收、投递车辆20,000余部。覆盖最广的网络体系为EMS实现国内300多个城市间次晨达、次日递提供了有力的支撑。

EMS具有高效发达的邮件处理中心。全国共有200多个处理中心，其中北京、上海和广州处理中心分别达到30,000平方米、20,000余平方米和37,000平方米，同时，各处理中心配备了先进的自动分拣设备。亚洲地区规模最大、技术装备先进的中国邮政航空速递物流集散中心也将于2008年在南京建成并投入使用。

EMS还具备领先的信息处理能力。建立了以国内300多个城市为核心的信息处平台，与万国邮政联盟（UPU）查询系统链 接，可实现EMS邮件的全球跟踪查询。建立了以网站（.ems.cn）、短信（5185）、客服电话（11185）三位一体的实时信息查询系统。

EMS一贯秉承 “全心、全速、全球”的核心服务理念，为客户提供快捷、可靠的门到门速递服务，最大程度地满足客户和社会的多层次需求。2005年先后荣获“中国消费者十大满意品牌”、“全国名优产品售后服务十佳”和“中国货运业快递信息系统和服务规范金奖”等奖项。

EMS的优点：1、速度最快。EMS可以说是目前最快的快递，到全国各大中城市均为1-3天。到县乡时间稍长1-2天。

2、安全性最高。EMS为国家企业，对于用户的邮件以及资金的安全性能够提供最好的保障。

3、网络强大，全国2000多个网点，让所有对手望尘莫及，而且这2000多个点都是他们自己的人。只要是地球上有人的地方EMS就能送到。

EMS的缺点：价格稍贵，20元起，和一些速度稍慢的快递公司比几乎贵了一倍。EMS部分服务人员服务态度不及某些快递公司态度好。 [编辑本段]EMS的发展史　　1980年7月15日，开办全球邮政特快专递业务(EMS)，是中国速递服务的最早供应商

年，开办国内特快专递业务

1994年1月18日，开通邮政特快专递跟踪查询网，实现快件的网上跟踪查询

2001年3月28日，建立了以上海为中心的邮政集散式自主航空快速网

2003年12月1日，开通上海至大阪自主航线，将自主国内网络延伸到国外

2004年以来，通过优化网络结构，相继提供次晨达、次日递和一系列增值服务

2004年8月18日，开通邮政航空快速网 — 全夜航

2005年7月15日，中国、澳大利亚、香港、日本、韩国和美国六邮政全面启动EMS承诺服务，共同对本邮政寄往其它五邮政的EMS邮件实行时限承诺服务

EMS现有业务分普通快递和次晨达加急快递两种。前者起价20元，后者起价50元。台湾件仅在指定邮局受理。 [编辑本段]EMS的其他含义　　0.EMS(Engine Manegement System)发动机管理系统

在以汽油机为动力的现代汽车上，发动机管理系统（Engine Management System，简称EMS）以其低排放、低油耗、高功率等优点而获得迅速发展，且日益普及。

EMS用各种传感器，把发动机吸入空气量、冷却水温度、发动机转速与加减速等状况转换成电信号，送入控制器。控制器将这些信息与储存信息比较，精确计算后输出控制信号。EMS不仅可以精确控制燃油供给量，以取代传统的化油器，而且可以控制点火提前角和怠速空气流量等，极大地提高了发动机性能。

通过喷油和点火的精确控制，可以降低污染物排放50%；如果用氧传感器和三元催化转化器，在λ=1的一个狭小范围内，可以降低有毒排放物90%以上。在怠速调节范围内，由于用了怠速调节器，怠速转速降低约100~150rpm，并使油耗得到进一步下降3~4%。如果用爆震控制，在满负荷范围内可提高发动机功率3~5%，并可适应不同品质的燃油。

随着世界范围内排放法规的日益严格，用EMS系统已成为不可阻挡的潮流。因此，UAES的产品在推进中国汽车工业现代化的进程中，具有广阔的应用前景。

1.Electronic Manufacturing Services的缩写，即电子制造服务，此类厂商为客户提供包含产品设计、代工生产、后勤管理、产品维修等服务。EMS公司和贴装公司最大区别在于，贴装公司仅提供贴装业务，其所有贴装的物料都是由客户提供的；而EMS公司除贴装以外，物料是自己购的，而且还能为客户提供设计、工程、测试等其它配套服务。目前国内有大量从事来料加工的“贴装”企业，通常不具备设计、工程、测试和物料购等方面能力，尚不能称为EMS企业。

2.EMS（Enhanced Message Service）中文意为增强型短消息服务。它比起传统的文字短信SMS来，其优势是除了可以像SMS那样发送文本短消息之外，还可以发送简单的图像、声音和动画等信息。而它更大的优势是EMS仍然可以运行在原有SMS运行的GSM网络上，并且在发送途径和操作方法上也没有差别。该标准属于开放式的，所以任何对EMS感兴趣的第三方公司或个人都可以在此平台上开发应用软件和服务。但由于各种手机品牌存在着技术上的不兼容情况，在实际使用中往往只能在相同品牌的手机间才能实现以上的相互传送，因此实用性有待进一步提高。

3.甲基磺酸乙酯的简称，一种重要的致癌物之一。生物学上可以用来创建突变体库、育种但是必须注意防护，防止诱导癌症。

用含有化学药剂的石蜡油处理玉米花粉是目前已知的最有效的方法。以EMS为例，具体的处理方法步骤如下：用EMS与轻质石蜡油混合，制备成浓度为0.1-0.2%EMS处理液；在适当的时间，收集玉米新鲜花粉，在一个带盖的瓶中，把花粉与EMS处理液混合；最后用一把小号毛刷，把被处理花粉涂到选好的雌丝上

4.network element management system 网元管理系统，网元管理是指对一个或多个网元进行管理,如交换机、复用器等的远端操作维护、设备软件、硬件的管理等.在网元管理层之后又分出一个网元层,网元层是由众多的网元构成,其功能是负责网元本身的基本管理。

5.Electric Managerment System 电能管理系统的缩写。电能管理系统是一套为电力系统控制中心提供数据集、监视、控制和优化，以及为电力市场提供交易安全分析服务的计算机软硬件系统的总称，它包括为上层电力应用提供服务的支撑软件平台和为发电和输电设备安全监视和控制、经济运行提供支持的电力应用软件，其目的是用最小成本保证电网的供电安全性。

6.Electromagnetic Susceptibility电磁敏感性。指在存在电磁骚扰的情况下，装置、设备或系统不能避免性能降低的能力。

7.中的数码集团大众化GIS平台研发部开发的嵌入式GIS平台。

8.Energy Management System 能源管理系统:能源管理系统是以帮助工业生产企业在扩大生产的同时，合理和利用能源，降低单位产品能源消耗，提高经济效益为目的信息化管控系统。

男病人怎样使用导尿管？

由于各种所需要的营养不同，所以培养基的种类很多。据估计目前约有数千种不同的培养基，这些培养基可根据所含成分、物理状态、以及不同的使用目的等而分成若干类型。

1.按照培养基的成分来分

培养基按其所含成分，可分为合成培养基、天然培养基和半合成培养基三类。

(1)合成培养基。合成培养基的各种成分完全是已知的各种化学物质。这种培养基的化学成分清楚，组成成分精确，重复性强，但价格较贵，而且微生物在这类培养基中生长较慢。如高氏一号合成培养基、察氏（Czapek）培养基等。

(2)天然培养基。由天然物质制成，如蒸熟的马铃薯和普通牛肉汤，前者用于培养霉菌，后者用于培养细菌。这类培养基的化学成分很不恒定，也难以确定，但配制方便，营养丰富，所以常被用。

(3)半合成培养基。在天然有机物的基础上适当加入已知成分的无机盐类，或在合成培养基的基础上添加某些天然成分，如培养霉菌用的马铃薯葡萄糖琼脂培养基。这类培养基能更有效地满足微生物对营养物质的需要。

2.按照培养基的物理状态分

培养基按其物理状态可分为固体培养基、液体培养基和半固体培养基三类。

(1)固体培养基。是在培养基中加入凝固剂，有琼脂、明胶、硅胶等。固体培养基常用于微生物分离、鉴定、计数和菌种保存等方面。

(2)液体培养基。液体培养基中不加任何凝固剂。这种培养基的成分均匀，微生物能充分接触和利用培养基中的养料，适于作生理等研究，由于发酵率高，操作方便，也常用于发酵工业。

(3)半固体培养基。是在液体培养基中加入少量凝固剂而呈半固体状态。可用于观察细菌的运动、鉴定菌种和测定噬菌体的效价等方面。

3.按照微生物的种类分

培养基按微生物的种类可分为细菌培养基、放线菌培养基、酵母菌培养基和霉菌培养基等四类。

常用的细菌培养基有营养肉汤和营养琼脂培养基；常用的放线菌培养基为高氏1号培养基；常用的酵母菌培养基有马铃薯蔗糖培养基和麦芽汁培养基；常用的霉菌培养基有马铃薯蔗糖培养基、豆芽汁葡萄糖（或蔗糖）琼脂培养基和察氏培养基等。

4.按照培养基用途分

培养基按其特殊用途可分为加富培养基、选择性培养基和鉴别培养基。

(1)加富培养基。是在培养基中加入血、血清、动植物组织提取液，用以培养要求比较苛刻的某些微生物。

(2)选择性培养基。是根据某一种或某一类微生物的特殊营养要求或对一些物理、化学抗性而设计的培养基。利用这种培养基可以将所需要的微生物从混杂的微生物中分离出来。

(3)鉴别培养基。是在培养基中加入某种试剂或化学药品，使培养后会发生某种变化，从而区别不同类型的微生物。

营养琼脂（普通琼脂）

成份：牛肉浸液（或其它浸液，消化液或肉膏汤） 100毫升

琼脂（视天气，琼脂质量而定）

制法：将上物加热溶解，补足水，调ph至7．6，过滤分装121℃，高压灭菌15分钟。

用途：作普通琼脂平皿。

血琼脂平板（BA）

制法：取营养琼脂（PH7．6），加热使其溶解待冷至45-50℃，以灭菌操作于每100毫升营养琼脂加灭菌脱纤维羊血或兔血5-10毫升,轻轻摇匀，立即倾注于平板或分装试管，制成斜面备用。

用途：1． 一般棉拭子均接种此培养基。

2．尿液，脓液

3．分离细菌标本用。

基础培养基 （肉膏汤BB）

成份：蛋白胨 10克 牛肉膏 5克

氯化钠 5克 水 1000毫升

制法：将以上各物称好，加水煮沸溶解，用1NNOH校正PH至7．6，过滤分瓶，121℃高压灭菌，20分钟备用。

用途：1 作耐药试验，增菌用分装小管。

2 作普通琼脂斜面。

血液培养基（大管肉汤培养基）

成份：1 新鲜牛肉浸液 1000毫升

2 PABA（对氨基苯甲酸〔相当于10mg/毫升〕） 1g% 1毫升

3 MgSO4 [相当于0．493/100毫升] 49．3% 1毫升

4 枸椽酸钠 0．3g

制法：1 将1号，4号混合液，2号，3号液分装高压灭菌。

2 取灭菌1，4号混合液用无菌法加入PABA，MgSO4，再分管，行无菌试验三天方可使用。

用途：作血，骨髓培养用。

肠道杆菌培养基（伊红美兰琼脂）

成份： 蛋白胨 10克 乳糖 10克

氯化钠 5克 琼脂 25（22）克

水 1000毫升 2%伊红溶液20毫升

0．5%美兰溶液 20毫升

制法：将蛋白胨，氯化钠琼脂称好，加水1000毫升使溶解，校正PH7．4过滤，补足失水，加入2%伊红溶液20毫升，0．5%美兰溶液20毫升，（115℃高压20分钟），冷却至50℃左右倾注平板，凝固后存冰箱备用。（高压以后方可再加乳糖）

用途：用作分离沙门氏，志贺氏菌属，也作菌群调查。

罗文斯坦培养基

成份：磷酸二氢钾 2．4克 硫酸镁 0．24克

枸椽酸钠 0．6克 天门冬素 3．6克

纯甘油（丙三醇） 12毫升 水 600毫升

马铃薯粉 30克 鸡蛋 1000毫升（约3公斤）

2%孔雀绿水溶液 20毫升

制法：1 除鸡蛋外（还有孔雀绿）。可将其它物品称好，放入大三角瓶包扎好，高压灭菌。

2 鸡蛋用75%酒精泡30分钟，灭菌法打蛋，倒入盛有玻璃珠的灭菌三角烧瓶内充分将鸡蛋摇散。

3 将各成份按比例配好，分装每管约5毫升。

4 间歇灭菌第一次90℃1小时，第二次80℃半小时，第三次80℃半小时（或放85℃烤箱内连续二次）。

质控标准： 1 灭菌试验合格。

2 接种结核杆菌要求两星期生长良好。

用途：作结核分枝杆菌培养用。

结核半固体培养基

成份：磷酸氢二钠 19克 硫酸镁 0．6克

磷酸二氢钾 2．5克 天门冬素 5克

1%孔雀绿 1．5克 甘油 20毫升

吐温80（10%） 5毫升 水 1000毫升

枸椽酸钠 2．5克 动物血清 100毫升

琼脂 1．5克（80小时用甲醇去脂）

1%孔雀绿 0．78毫升 吐温80（10%） 5毫升

加动物血清 100毫升

制法： 1 除血清外将上述药品均称好，放入煮沸溶解，调PH7。2

2 分管（每管约10毫升）包扎好，高压，121℃半小时灭菌。

3 待冷后无菌法加无菌血清（绵羊血或兔血）每管约1毫升备用。

2 临床微生物培养基手册

4 去除琼脂方法：取琼脂若干或于三角烧瓶中加甲醇于琼脂1毫升用塞密封，放37℃温浴80小时，每天摇动一次，冷却后到时取出用滤纸过滤，待琼脂自然冷却后备用。

质控标准：1无菌实验合格。

2琼脂硬度合适而清亮。

3接种标准结核杆菌用，强度合适即可用。

用途：培养结核杆菌用。

亚碲酸钾血琼脂平板

成份：琼脂基础 100毫升 10%葡萄糖 2毫升

1%亚碲酸钾 4．5毫升 绵羊血 10毫升

制法：1将琼脂基础溶解好，加入羊血。

2马上加热使成咖啡色后，稍冷再加入10%葡萄糖2毫升与1%亚碲酸4．5毫升混合后倒入无菌平板，

2

凝固后存冰箱备用。

质控标准：接种白喉杆菌生长良好，其它革兰氏阴性菌均抑制生长。

用途：供培养及鉴别白喉杆菌用。

米培养基

成份：白米 20克 水 1000毫升

琼脂 20克 吐温80 10毫升

制法：1将20克米加水200毫升煮沸45分钟，煮时将容器盖好。

2用纱布过滤，只要米汤，不要饭，加水至1000毫升。

3加琼脂20克，吐温-80 10毫升煮溶，分装中型管（每管约3毫升），包扎好，高压，121℃半小时，消毒备用。

质控标准：1灭菌。

2要求清亮。

3接种白色念珠菌17-24小时生长良好，并产生厚膜孢子。

用途：培养白色念珠菌用。

蛋白胨水培养基

成份：蛋白胨 1克 氯化钠 0．5克

水加至 100毫升 PH调至 7．8

制法：把以上各物称好溶于水，调节PH7．6分装消毒备用。

质控标准：1 放置37℃无菌生长。

2 接种大肠杆菌24小时生长良好。

3 可作中国兰平板基础液。

可作靛基质基础液（作此试验需要色氨酸蛋白胨）。

血培养基

成份：蛋白胨 10克 牛肉膏 5克

氯化钠 5克 葡萄糖 3克

枸椽酸钠 3克 MgSO4。7H2O 20毫升

0．5%PABA 10毫升 酵母浸液 10毫升 0．2克（2%过滤）

*酚红0．4% 6毫升 水 1000毫升

琼脂 0．5克

*：作大BB，小BB时，不要加酚红和琼脂。

制法：1。除PABA、硫酸镁、酚红外均称好煮化调PH7．4

2。调好PH后再加酚红。

3。硫酸镁、PABA另外无菌再加入（亚细，小BB）

沙氏培养基

成份：蛋白胨 1克 水 100毫升

琼脂 1．5克（琼脂粉1克%） 葡萄糖或麦芽糖 4克

3

制法：1将上述物质称好，放入水中煮沸溶解（不必调PH即有5左右）分中号试管（约4毫升）包扎，高压115℃20分钟。

2 趁热斜好，凝固备用。

质控标准：1无菌试验合格。

2接种霉菌比在其它培养基上生长良好，其它菌生长不好。

用途：作分离培养霉菌用。

注意：1 接种临床新鲜标本可先加1-2滴70%酒精让干后再接种于含12．5%氯霉素沙氏斜面培养基上。

2 也可用蜂蜜8克代替葡萄糖或麦芽糖。

肉渣培养基

成份： 牛肉渣 牛肉浸液（牛肉膏）

制法：将做牛肉浸液的牛肉渣，装入试管，高约3毫米，加入牛肉浸液或牛肉膏汤（PH7．6）约5毫升，比肉渣高一倍，液面上加入已溶解的凡士林，高约0．5厘米（不加也可），121℃高压灭菌20-30分钟后保存于冰箱内备用 。

用途：用于厌氧菌培养。

注意：如无肉渣也可用牛、羊血等代替，将血块先放入水内煮沸，取出成小块，血块在加热后摇匀成碎颗粒状。

单糖发酵管培养基（半固体）

3 临床微生物培养基手册

成份： PH7．6-7．8蛋白胨水 1000毫升（0．3克/100毫升）

1．2%酚红液 0．4毫升

琼脂 0．4 - 0．5克

10%糖或醇 10毫升

制备：把蛋白胨水，琼脂加热溶解，然后加1．2%酚红液0．4毫升，10%糖10毫升，混匀，分装试管，每管约2-3毫升，经115℃高压灭菌20分钟后，分置于试管架上，贴上各类糖或醇类标签备用。

质控标准：细菌发酵糖类或醇而产生酸，能使培养基PH改变，指示剂由红变**，如因发酵产生气体则

半固体内产生气泡，如有动力则半固体由清亮变混浊。

明胶培养基

成份：肉浸液 1000毫升（牛肉浸膏5克）

明胶 12克

制法：

100毫升肉浸液中，加入明胶12克，隔水加热煮化，校正PH7．2，分装小号试管，用阿诺氏间歇灭菌80℃30分钟，连续3日，或者108℃高压20分钟，冷却，贮存备用。

碱性蛋白胨水

成份：

蛋白胨 20克 氯化钠 5克

硝酸钾 0．1克 结晶碳酸钠（NaclCO3．12H2O） 0．2克

水 1000毫升

4

制法：将蛋白胨，Nacl，硝酸钾，结晶碳酸钠称好，溶于1000DW中，校正PH8．4分装试管，121℃高压

灭菌15分钟后备用 。

用途：用于霍乱弧菌培养。

葡萄糖蛋白胨水（M。V用）

成份：蛋白胨 5克 葡萄糖 5克

K2HPO4 5克 水 1000毫升

制法：将上述称好溶解分装试管，调PH7．4高压灭菌115℃ 灭菌20分钟 ，或者葡萄糖加热煮沸后再倒试管

标准：灭菌试验合格。

接种大肠杆菌VP阴性，M阳性；接种产气杆菌VP阳性，M阴性。

用途：作鉴别肠道杆菌用。

枸椽酸盐培养基

成份：磷酸二氢铵 0．1克 硫酸镁 0．02克

磷酸氢二钾 0．1克 枸椽酸钠 0．23--0．5克（0．36）

氯化钠 0．5克 琼脂 1．5克

0．5%溴麝香草酚兰2毫升 （调PH6．8再加）

制法：将上述称好，放入水中煮沸溶解，调PH6．8，然后分装中号试管，高压灭菌，趁热倒呈斜面，凝固

后备用。

标准：1灭菌试验合格，培养基呈果绿色适宜。

2接种大肠杆菌，培养基上不生长，也不变色。

3接种产气杆菌，培养基呈深兰色。

用途：作鉴别大肠杆菌用。

双糖铁培养基

成份：

下层：蛋白胨 1克 氯化钠 0．5克

葡萄糖 0．2克 琼脂 0．3-0．5克

水 100毫升

将上述物质混匀调PH7．6后加1．2%酚红0．4毫升

上层：蛋白胨 1克 氯化钠 0．5克

乳糖 1克 硫代硫酸钠 0．03克

硫酸亚铁 0．02克 琼脂 1克

水 100毫升

制法： 1将下层配好，分装中号试管（1毫升），塞好包扎，15磅高压灭菌半小时，使凝固后备用。

2制上层时，先将蛋白胨水制好，加入硫酸亚铁，硫代硫酸钠，加热溶解PH8．1，再加入酚红分瓶，（每瓶300毫升，称取琼脂包扎灭菌，趁热加入乳糖隔水煮沸30分钟或112℃消毒15分钟）。

3取已制的下层管，每管用无菌法倒入上层液约1。5毫升，边斜放置使成斜面，凝固后备用。

标准：无菌试验合格，接种大肠杆菌下层产酸产气，上层产酸。

尿素培养基

成份：蛋白胨 0．1克 氯化钠 0．5克

磷酸二氢钾 0．2克 尿素 0．2克（或10%2毫升）

葡萄糖 0．01克（或10%葡萄糖0．1毫升）

H2O 100毫升 酚红（0．2%） 0．4毫升

4 临床微生物培养基手册

制法：1除葡萄糖，尿素外把其它药品称好放入水中煮沸，使溶解，调PH7．2过滤，15磅高压灭菌15分钟．

2配制尿素（灭菌）液：每100毫升基液内加2毫升．

3配制10%葡萄糖（灭菌）每100毫升加0．1毫升．

4分装小试管待用．

标准：

1灭菌试验合格．

2接种变形杆菌24小时呈红色．

用途：鉴定变形杆菌用．

胆盐中性红琼脂

成份：蛋白胨琼脂PH7．2-7．4 5000毫升

胆 盐 2．5克

乳糖 5．0克

对氨基苯甲酸 25毫克

1%中性红溶液 25毫升

制法：

将胆盐，对氨基苯甲酸，乳糖趁热加入已灭菌之蛋白胨琼脂中，待冷至50-60℃时，加入1%中性红液2．5毫升，混合后即倾注平皿，凝固待用．

*：1%中性红：1克中性红加酒精60毫升，加水40毫升

丙二酸盐培养基（缩苹果酸钠）

成份：丙二酸钠 0．3克 酵母浸膏 0．1克

Nacl 0．2克 硫酸铵 0．2克

K2HPO4 0．06克 KH2PO4 0．04克

水 100毫升

PH6．8，高压灭菌备用．

0．2%溴麝香酚兰乙醇 1．25毫升

制法：与枸椽酸盐利用试验相类似，是测定细菌能否利用丙二酸盐与碳源．无机铵盐为氨源而生长，生长者使培养基变成碱呈兰色．

鉴定： 克氏杆菌 （+） 赫夫尼亚 （+）

沙门氏菌 （—） 痢疾杆菌 （—）

苯丙氨酸培养基

成份：酵母浸液 1．5克 DL--苯丙氨酸 1克

磷酸氢二钠（无水）0．5克（或L-苯丙氨酸 0．5克）

氯化钠 2．5克 琼脂 6克

水 500毫升 PH7．4

制法：1 将上述成份加热溶解，分装于12*125mm口径的试管中，每管约4毫升．

2 高压灭菌15磅10分钟，趁热使试管斜置凝固后备用．

3 接种时划斜面．

用途：鉴定沙门氏菌用．苯丙氨酸脱氨酶试验沙门氏菌阴性．

双抗培养基

成份：

蛋白胨 10克 牛肉膏 5克

氯化钠 5克 无水亚硫酸钠 3克

柠檬酸钠 10克 蔗糖 10克

琼脂粉 20克 水 1000毫升

制法：

1将上物称好，加热溶于水中．

2调PH8．2—8．4

3 分装高压灭菌后备用．

倾注平板前先加热溶解琼脂等冷至50℃左右，按无菌操作加入多、庆抗菌素充分摇匀， 倾注平板，凝固后备用．

（庆大霉素：150u/毫升，多粘菌素：1500u/毫升, 2毫升加至1000毫升培养基内，此相当于庆大霉素0.3u/毫升, 多粘菌素3u/毫升）

O2培养基

保存液：（文—腊氏液）

A液：硼酸 12．405克 KCL 14．912克

水 1000毫升

取A液250毫升 0．8%NAOH 133．5毫升

NACL 20克 水 1000毫升

分装高压灭菌．

硝酸盐胨水

成份：

蛋白胨 1克

硝酸钾（无NO2） 0．1克

H2O 100毫升

PH7．4，高压灭菌分装备用．

（如无硝酸钾也可用硝酸钠0．02克，NACL0．05克，H2O100毫升）

用途：硝酸盐还原试验用．

原理：测定细菌能否还原硝酸盐为亚硝酸盐，后者在酸性条件下与a—萘胺和对氨基苯磺酸发生重氮反应，生成红色的1-萘-4偶氮苯对磺酸．

制法：试剂甲液A对氨基苯磺酸0．8克溶于5N的醋酸100毫升．

B：乙液a-萘酚0．5克溶于5N的醋酸100毫升中

将细菌接种于硝酸盐水中37℃培养24--96小时，加入甲液0．1毫升，再加入乙液数滴，立即呈现红或紫色为阳性

5 临床微生物培养基手册

king氏培养基（能促进绿脓菌绿色素产生）

成分：

蛋白胨 2克 K2SO4 1克

甘油 1克 MGCL2 0.14克

琼脂 1.5克 H2O 100毫升

KING氏培养基（能促进绿脓菌荧光色产生）

成分：

蛋白胨 2克 甘油 1克

K2SO4 0.15克 MGSO4 4.7克 H2O 0.15克

琼脂 1.5克 H2O 100毫升

调PH7.2 15磅20分钟消毒后使成斜面备用．

七叶苷水解试验

原理：

粪链球菌能分解七叶苷（Escalin）其代谢产物与铁离子结合产生黑色沉淀，使培养基变黑．

方法：

将菌种接种在七叶苷或琼脂上37℃18小时，观察结果，培养基变黑色，其他链球菌能生长但不变黑色，肺炎链球菌不长．

成分：

七叶苷 0.1克 胰胨 1.5克

枸橼酸铁 0.2克 琼脂 2.0克（0.5克/50毫升）

胆汁 2.5毫升 H2O 100毫升

PH7.0分装小试管内高压灭菌后备用（10磅20分钟）

七叶苷又名桑树皮甙，七叶灵，Aesclin Escnlim Bicolorin等．为白色针状结晶．水溶液兰色荧光．）

葡萄糖氧化发酵培养基（O/F）

成份：

蛋白胨 2．7克 氯化钠 5．0克

0．2%溴麝香酚兰 0．03克 琼脂 3克

KH2PO4 0．3克 葡萄糖 10．0克

水 1000毫升

制法：以上成份除糖外，溶解调PH7．0，10磅高压灭菌20分钟后备用．

方法：挑取少量培养物接种两管，其中一管接种后加液体石腊不少于1厘米厚，两管同时35℃，培养过夜，

观察颜色的变化，若无颜色变化，需继续观察七天，每日观察刺层型别．

用途：适用于微球菌科和非发酵菌的鉴定．

麦康凯培养基

成份：

蛋白胨 20克 氯化钠 5克

乳糖 10克 琼脂 20克

H2O 1000毫升 1%中性红溶液 3--4毫升

1%结晶紫 0．1毫升 PH7．4

除中性红临时用时加入外，其余均高压灭菌备用．

邻硝基酚半乳糖甙（ONPG）酶试验

缓冲液：

Na2H2PO4 6．9克 溶于40DW中，用5NNOH调PH7．0，再加水到50毫升，冰箱保存．用前若有结晶可稍加温，溶解后再用．

ONPG液：

称取ONPG（邻硝基酚--B--D半乳糖苷）80毫克，溶于15毫升D.W中，再加上缓冲液5毫升，放入冰箱中保存．此液不稳定，如出现**即不能用．

鉴别：

脑膜炎球菌和乳糖球菌及沙门氏菌属与枸橼酸菌属及亚利桑那氏菌属．

脑膜炎球菌和沙门氏菌属为阳性．

乳球菌，枸橼酸菌属和亚利桑那菌属为阳性．

半固体培养基

成份：

牛肉膏 3克 蛋白胨 10克

氯化钠 5克 琼脂 2．5--4克

水 1000毫升

校正PH7．4，15磅高压15分钟．倾注平板，厚度约4mm，冷藏备用．

氨基酸脱羟试验培养基

成份：

L-氨基酸 0．5克 蛋白胨 0．5克

牛肉膏 0．5克 葡萄糖 0．05克

吡多醛 0．5克 水 100毫升

2%溴甲酚紫乙醇液 0．5毫升 2%甲酚红 0．25毫升

制法：除指示剂及氨基酸外，溶解，PH6．0，然后加入氨基酸（必要时重新调PH）及指示剂，混匀分装1毫升/管加10毫米厚石蜡油，高压10--15磅10--15分钟灭菌备用．

6 临床微生物培养基手册

注意：

1 使用DL型AA时量加倍．

2 最好同时接种空白管（即不含有AA的同样培养基）作对照．

3 培养基超过24小时可出现阳性．

葡萄糖酸盐培养基

成份：

蛋白胨 1．5克 酵母浸液 1克

K2HPO4 1克 葡萄糖酸钾 40克

DW 1000毫升

溶解过滤分装，高压10磅15分钟．

结果：加班氏试剂，加热观察结果．

黄-橙色为阳性． 无颜色变化为阴性．

这些是我在网上摘的别人的 下面给了连接

导尿术 教学目标1．掌握男人导尿的方法及操作步骤。2．熟悉女人导尿的方法及操作步骤。一、导尿术导尿术是用无菌导尿管自尿道插入膀胱引出尿液的方法。导尿可引起医源染，因此，在操作中应严格掌握无菌技术，熟悉男、女性尿道解剖特点。避免增加病人的痛苦。（一）目的1．解除各种原因所致的尿潴留。2．探测尿道又无狭窄或梗阻。3．检查膀胱功能，测膀胱容量、压力及残余尿量。4．注入造影剂 ，或药物灌注治疗法。（二）用物1．消毒包内有小弯盘1个，持物钳2把，大棉球10个，纱布2块，左手手套1只。2．导尿包内有方盘1个，治疗碗2只，导尿管8号和10号各1条，止血钳2把，小药杯2个，大棉球2个，洞巾1块，纱布2块，手套1副。3．另备0.1%新洁尔灭溶液，无菌石蜡油，胶布，治疗巾、大毛巾、弯盘。（三）操作方法1．女性导尿法 女性尿道短，约3－5cm 长，富于扩张性，尿道口在下方，呈矢状裂。老年妇女由于会阴肌肉松弛，尿道口回缩，插导尿管时应正确辨认。（1）备好用物进病房，向病人说明目的，取得合作，遮挡病人。（2）能自理者，嘱其清洗外阴，不能起床者，协助其清洗外阴。病人取仰卧位，护士立于病人右侧，将盖被扇形折叠盖于病人胸腹部。脱近侧裤腿，盖于对侧腿上，近侧下肢用大毛巾遮盖，嘱病人两腿屈膝自然分开，暴露外阴。（3）将治疗巾（或一次性尿布）垫于臀下，弯盘放于床尾。开消毒包，备消毒液，左手戴无菌手套，将已备好的清洗消毒用物置于病人两腿之间，右手持止血钳夹0.1%新洁尔灭棉球清洗外阴，其原则由上至下，由内向外（外阜1个，大腿内侧各1个）。清洗完毕，另换止血钳，左手拇、食指分开大，以尿道口为中心，顺序是：尿道口、前庭、两侧大小清洗各一棉球，最后一棉球消毒尿道口至会阴、肛门，每一个棉球只用一次，污棉球及用过的钳子置于床尾弯盘内。（4）打开导尿包，备0.1%新洁尔灭溶液、无菌石蜡油。戴无菌手套，铺洞巾，润滑导尿管前端，以左手拇、食指分开大 ，右手持止血钳夹消毒棉球再次消毒尿道口。（5）另换一止血钳持导尿管轻轻插入尿道4－6cm，见尿后再插入1－2cm。（6）如需作尿培养，用无菌标本瓶或试管接取，盖好瓶盖，置合适处。（7）治疗碗内尿液盛满后，用止血钳平导尿管末端，交于左手中指间，将尿液倒入便盆内。（8）导尿毕，用纱布包裹导尿管，拔出，放入治疗碗内。擦净外阴，脱去手套，撤去洞巾，清理用物，协助病人穿裤，整理床单位，测量尿量并记录，标本送验。2．男性导尿术 成人男性尿道全长约17－20cm，有两个弯曲即活动的耻骨前弯和固定的耻骨下弯；三个狭窄部即尿道内口、膜部和尿道外口，导尿时，须掌握这些解剖特点，以便导尿管顺利插入。（1）备好用物进病房，向病人说明其目的，取得合作，遮挡病人。（2）能自理者，嘱其清洗外阴，不能起床者，协助其清洗外阴。病人取仰卧位，护士立于病人右侧，将盖被扇形折叠盖于病人胸腹部。脱近侧裤腿，盖于对侧腿上，近侧下肢用大毛巾遮盖，嘱病人两腿屈膝自然分开，暴露外阴。（3）铺治疗巾于病人臀下，开消毒包，备消毒液，左手戴手套，用消毒液棉球清洗两次。左手持无菌纱布包住，后推包皮，充分暴露尿道口及冠状沟，严格消毒尿道口、，螺旋形向上至冠状沟，最后消毒背侧及阴囊，每个棉球限用一次。（4）打开导尿包，备0.1%新洁尔灭溶液，无菌石蜡油。戴无菌手套，铺洞巾。滑润导尿管15－20cm。暴露尿道口，再次消毒，提起使之与腹壁成60度角。（5）另换止血钳持导尿管轻轻插入尿道18－20cm左右，见尿后再插入1－2cm。（6）若插导尿管时，遇有阻力，可稍待片刻，嘱病人张口作深呼吸，再徐徐插入。切忌暴力。（7）根据需要留取尿培养标本，拔管同女性导尿术。（8）导尿完毕，清理用物，整理床单位。（四）注意事项1．严格执行无菌技术及消毒制度，防止医源染。导尿管一经污染或拔出均不得再使用。2．插入、拔出导尿管时，动作要轻、慢、稳、切勿用力过重，以免损伤尿道粘膜。3．对膀胱高度膨胀且又极度虚弱的病人，第一次导尿量不可超过1000ml，以防大量放尿，导致腹腔内压突然降低，大量血液滞留于腹腔血管内，造成血压下降，产生虚脱，亦可因膀胱突然减压，导致膀胱粘膜急剧充血，引起尿血。（五）并发症1.尿道损伤、出血2.泌尿道感染3.男性生殖系感染，如急性附睾炎二、导尿管留置法留置导尿管术是在导尿后,将导尿管保留在膀胱内,引流尿液的方法。（一）目的1．用于截瘫所致尿潴留或尿失禁病人。2．盆腔手术前留置导尿管，以 防术中误伤膀胱。3．尿道、会阴术后定时放尿。可保护创面及切口清洁不受污染。4．用于某些大手术后或大面积烧伤，以及危重病人的抢救，可借以观察肾功能。（二）双腔气囊留置导尿操作步骤1、按导尿术插入导尿管，见尿后再插入1cm～2cm，向气囊注入生理盐水10 ～ 15ml，轻拉导尿管有阻力感，即证实导尿管已固定于膀胱内。 2、将导尿管尾端与集尿袋的引流管接头连接，开放导尿管，将集尿袋妥善地固定在低于膀胱的高度。留置导尿病人的护理1、保持尿道口清洁 女病人用消毒液棉球擦拭外阴及尿道口，男病人用消毒液棉球擦拭尿道口、及包皮，每天1 ～2次。

2、每日更换集尿袋，及时排空集尿袋；每周更换导尿管1次。3、鼓励病人多饮水（每日2000毫升），达到自然冲洗尿路的目的。

4、注意观察病人尿液变化情况，每周尿常规检查1次，发现尿液混浊、沉淀，有结晶时，应及时处理。5、长期留置导尿者，在拔管前可能性作间隙引流夹管，即每3-4小时放尿一次，训练患者膀胱反射功能。三、膀胱冲洗法（一）目的1．清洁膀胱，使尿液引流通畅。2．治疗某些膀胱疾病，如膀胱炎。3．泌尿外科的术前准备和术后护理。（二）常用冲洗溶液生理盐水，0.02％呋喃西林溶液，3％硼酸溶液，0.2%洗必泰，0.1％雷呋奴尔溶液，2.5％醋酸。（三）用物全套导尿用物，膀胱冲洗器（包括冲洗瓶、连接橡皮管、丫形管），冲洗液，别针，调节器2个，输液架。（四）操作方法1．依导尿术插入导尿管，并按留置导尿管法固定导尿管。2．倒溶液于冲洗瓶内，挂于输液架上（瓶底离床沿60cm）。连接冲洗装置各部（丫型管的两个分管，一接引流管，另一接导尿管，主管连接冲洗管），将橡皮管用别针固定于床单上。3．冲洗前，使膀胱排空，然后夹紧引流管，开放冲洗管，使溶液滴入膀脱，滴速一般为40－60滴／分。待病人有尿意时（或滴入溶液200－300ml后），夹紧冲洗管，打开引流管，将冲洗液全部引流出来，再夹紧引流管，按需要量，如此反复冲洗。引流时，丫形管须低于耻骨联合，以使引流彻底，每天可冲洗3－4次。（五）注意事项1．严格无菌操作，防止医源染。2．寒冷气候，冲洗液应加温至38－40℃，以防冷刺激膀胱。3．冲洗时，注意观察引流液性状，出现鲜血、导管堵塞或病人感到剧痛不适等情况，应立即停止冲洗，报告医生四、膀胱滴药法常用药液：5－10％弱蛋白银，0.2%呋喃西林溶液，0.5%硝酸银，1％新霉素及其他抗生素。（一）小量滴药法1．用物 全套导尿用物，注洗器，药液。2．操作方法 导尿后放尽尿液，将药液倒入治疗碗内，用注洗器抽吸药液，从导尿管慢慢注入膀胱，然后提起导尿管末端，使药液全部流入膀胱。（二）大量滴药法1．用物 全套膀胱冲洗用物，药液。2．操作方法 同膀胱冲洗法。放尽尿液，夹紧引流管，调节滴速（每分钟约80滴），滴完后保留20分钟，再让药液流出。滴入刺激性强的药物（硝酸银），药液滴完后，再用生理盐水冲洗膀胱。五、耻骨上膀胱穿刺术耻骨上膀胱穿刺适用于急性尿潴留导尿术未成功，而又急需排尿或送检尿标本者。（一）用物 治疗盘内备膀胱穿刺包（内有治疗巾1块，洞巾1块，无齿镊1把，止血钳1把，布巾钳2把，膀胱穿刺针1套或9号针头1枚，弯盘1个，药杯2个，5ml 及50ml注射器各1副，6号7号针各1枚，纱布3块，棉球数个），2％碘酒，70％酒精，持物钳，无菌手套，胶布，2％普鲁卡因2支，治疗巾，1000ml量杯，另备便盆。（二）穿刺部位 耻骨联合中点上1－2cm处。（三）操作方法1．术前做普鲁卡因试验。2．备齐用物携至床旁，屏风遮挡病人，并向其介绍膀胱穿刺的目的与方法，取得合作。3．叩诊证实膀胱充盈。洗手，戴口罩，打开膀胱穿刺包。4．协助病人解衣裤，露出穿刺部位。治疗巾垫于病人臀下。5．常规消毒穿刺部位皮肤，戴手套，铺洞巾，以布巾钳固定，行局部。6．穿刺针栓部接无菌橡皮管，并用止血钳夹紧橡皮管，左手拇、食指固定穿刺部位，右手持穿刺针垂直刺入膀胱腔，见尿后再进针1－2cm，然后在橡皮管末端套上50ml注射器，松开止血钳，开始抽吸，满50ml后夹管，将尿液注入量杯，如此反复操作。膀胱过度膨胀者，每次抽出尿液不得超过1000ml，以免膀胱内压降低，而导致出血或休克的发生。必要时留标本送验。7．抽毕，用碘酒消毒穿刺点，盖以纱布，胶布固定，帮助病人卧床休息。8．整理床单位，清理用物，记录尿量及性质。六、膀胱穿刺留置导尿法膀胱穿刺留置导尿术常用于前列腺肥大导致排尿困难的病人。（一）用物 同耻骨上膀胱穿刺术。（二）操作方法 局部后以细针穿刺，见有尿液，即以14号穿刺套管针穿刺，拔出针芯，通过套管插入有1－2个侧孔的硅胶管，再拔出套管,穿刺点用无菌纱布覆盖，固定，接集尿袋。穿刺点每周消毒2－3次，优质硅胶导尿管可1－2个月更换。